Multiplex Bir ädim RT-qPCR Premiks
Düşündiriş
Pişik belgisi: HCR5141A
Multiplex Bir ädim RT-qPCR Premix, şablon hökmünde RNK esasly köp sanly PCR toplumy.Synagda ters transkripsiýa we mukdar PCR şol bir reaksiýa turbasynda ýerine ýetirilýär, tejribe işini ýönekeýleşdirýär we hapalanmak howpuny azaldýar.Bufer we ferment garyndysynyň özboluşly dizaýny bir basgançakly lýofilizirlenen ulgamda ulanylyp bilner.Kitapda mukdar güýçlendirmek üçin hotstart Taq DNA polimerazyny ulanyp, birinji hatar cDNA-ny netijeli sintez etmek üçin ýylylyga çydamly ters transkriptaz ulanylýar.Onda optimallaşdyrylan reaksiýa buferi, fermentleriň garyndysy we ş.m. bar we ýörite däl PCR güýçlendirilmegini netijeli päsgel berýän we birnäçe qPCR reaksiýasynyň güýçlendirme netijeliligini ýokarlandyrýan faktorlar goşuldy, primerleriň güýçlendirme netijeliligini üpjün etmek bilen birnäçe floresan mukdar güýçlendiriş mümkinçiligini berdi.
Komponentler
| Ady |
| 1. Lýo-Bufer |
| 2. Lýo-ferment garyndysy |
| 3. Lyo goraýjy |
Ulag geçirijisiion
J: Lyo-bufer we goraýjy: -25 ~ -15 ℃, ýaramlylyk möhleti 1 ýyl.
B: Lýo-ferment garyndysy, 2-8 ℃, ýaramlylyk möhleti 6 aý.
Işlemek üçin görkezme
1. Reaksiýa ulgamy (Mysal üçin 25μL alyň)
| Komponentler | Ses (μL) | Jemleýji konsentrasiýa |
| Lýo-Bufer | 6 | 1* |
| Lýo-ferment garyndysy | 1 | - |
| Lyo-goraýjy | 8 | - |
| Primer garyndysy (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Synag garyndysy (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| RNK şablony | 5 | - |
| DEPC H2O | 25-e çenli | - |
2. Optimal welosiped protokoly
1) Tigir sürmek boýunça standart teswirnama
| Reaksiýa tapgyry | Temperatura | Wagt | Sikl | |
| 1 | Tersine transkripsiýa | 50 ° C.a | 10min | 1 |
| 2 | Başlangyç denaturasiýa | 95 ° C. | 5min | 1 |
| 3 | Güýçlendirmek reaksiýasy | 95 ° C. | 15 sek | 45 aýlaw |
| 60 ° C.b | 30 sekc |
2) Tigir sürmek teswirnamasy
|
| Reaksiýa tapgyry | Temperatura | Wagt | Sikl |
| 1 | Tersine transkripsiýa | 50 ° C.a | 2min | 1 |
| 2 | Başlangyç denaturasiýa | 95 ° C. | 2 sek | 1 |
| 3 | Güýçlendirmek reaksiýasy | 95 ° C. | 1 sek |
45 aýlaw |
| 60 ° C.b | 13 sekc |
Bellik:
a) Tersine transkripsiýa: Temperatura 10-15 minut üçin 42 ° C ýa-da 50 ° C saýlap biler.
b) Güýçlendirmek reaksiýasy: Temperatura dizaýn edilen desgalaryň Tm bahasyna görä düzülýär.
ç)Floresan signal almak: Synag prosedurasyny talaplara laýyklykda düzmegiňizi haýyş edýärisgural gollanmasy.
Tehniki maglumatlar / Aýratynlyklar
| Gyzgyn başlangyç | Gurlan gyzgyn başlangyç |
| Ectionüze çykarmak usuly | Esasy gözleg |
| PCR usuly | Bir ädim RT-qPCR |
| Nusganyň görnüşi | RNK |
Bellikler
1. Bu önüm diňe gözleg üçin ulanylýar.
2. Saglygyňyzy we howpsuzlygyňyzy üpjün etmek üçin zerur PPE, şeýle laboratoriýa palto we ellik geýiň
