Bir ädim çalt RT-qPCR Probe Premix-UNG
Pişik belgisi: HCR5143A
Bir ädim RT-qPCR gözleg toplumy (Çaltlyk üçin), RNK-ny şablon hökmünde (RNA wirusy ýaly) ulanyp, bir pleks ýa-da köp sanly PCR üçin amatly RT-qPCR çalt kesgitleýiş toplumy.Bu önüm çalt güýçlendirmek üçin optimallaşdyrylan bufer bilen, güýçlendirme tizligini, ýokary güýçlendiriş netijeliligini we aýratynlygyny öz içine alýan antikor üýtgedilen Taq DNK polimerazynyň we bir basgançakly ters transkriptazyň täze neslini ulanýar.Gysga wagtyň içinde bir pleksde we pes we ýokary konsentrasiýa nusgalarynyň multiplexinde deňagramly güýçlendirmegi goldaýar.
Komponentler
1. 5 × RT-qPCR buferi (U +)
2. Ferment garyndysy (U +)
Bellikler:
a.5 × RT-qPCR buferi (U +) dNTP we Mg öz içine alýar2+;
b.Ferment garyndysy (U +) ters transkriptaz, Hot Start Taq DNK polimeraza, RNase inhibitory we UDG;
c.RNase-den mugt maslahatlary, EP turbalaryny we ş.m. ulanyň.
Ulanylmazdan ozal 5 × RT-qPCR buferini (U +) gowy garmaly.Eremeden soň ýagyş bar bolsa, buferiň otag temperaturasyna gaýdyp gelmegine garaşyň, garyşdyryň we erediň, soňra adaty ulanyň.
Saklamak şertleri
Önüm gury buz bilen iberilýär we -25 ~ -15 at derejesinde 1 ýyl saklanyp bilner.
Görkezmeler
1. Reaksiýa Ulgam
| Komponentler | Ses (20 μL) reaksiýa) |
| 2 × RT-qPCR buferi | 4μL |
| Ferment garyndysy (U +) | 0.8μL |
| Primer Forward | 0,1 ~ 1.0μM |
| Primer tersi | 0,1 ~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05 ~ 0.25μM |
| Şablon | X μL |
| RNase erkin suw | 25μL çenli |
Bellikler: Reaksiýanyň göwrümi 10-50μL.
2. Tigir sürmek teswirnamasy (S.tandard)
| Sikl ädim | Temp. | Wagt | Sikller |
| Tersine transkripsiýa | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Başlangyç denatasiýa | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturasiýa | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Annealing / Giňeldiş | 60 ℃ | 30 sek |
| Tigir sürmek teswirnamasy (Çalt) Sikl ädim |
Temp. |
Wagt |
Sikller |
| Tersine transkripsiýa | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Başlangyç denatasiýa | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturasiýa | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Annealing / Giňeldiş | 60 ℃ | 10 s |
Bellikler:
a.Tersine transkripsiýa temperaturasy 50 ℃ 60 between aralygyndadyr, temperaturanyň ýokarlanmagy çylşyrymly gurluşlary we ýokary CG mazmun şablonlaryny güýçlendirýär;
b.Iň amatly gyzdyryjy temperatura, primeriň Tm bahasyna görä sazlanmaly we Real Time PCR guralyna esaslanýan floresan signal ýygnamak üçin iň gysga wagt saýlamaly.
Bellikler
Saglygyňyzy we howpsuzlygyňyzy üpjün etmek üçin zerur PPE, şeýle laboratoriýa palto we ellik geýiň!
