RT-LAMP kolormetrik ussat garyndysy HCB5204A
Bu önümde reaksiýa buferi, RT-fermentler garyndysy (Bst DNK polimeraza we ýylylyga çydamly ters transkriptaz), lýofilizlenen goragçylar we hromogen boýag komponentleri bar.Ulanmak üçin diňe Bufferi ulanyň, reaksiýa fermenti we primer garylyp, şablona goşulýar;lyofilizlenen goraýjy goşmak göni bolup biler.Lýofilizator bilen birleşdirildi we lyofilizasiýa edildi, ulanylanda diňe primerler we şablonlar goşuldy.Bu toplum güýçlendirişiň çalt, aýdyň wizual tapylmagyny üpjün edýär, negatiw reaksiýa gyzyl reňkde görkezilýär we polo positiveitel reaksiýa sary reňk bilen görkezilýär.
Komponent
| Komponent | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Aýlawly ara güýçlendiriji bufer (boýag bilen) | 0.96 ml | 4.80 ml × 2 | 9,60 ml × 10 |
| RT-fermentler garyndysy | 270 μL | 2.70 ml | 2.70 ml × 10 |
| Lýofilizlenen goragçy | 0.96 ml × 2 | 9,60 ml × 2 | 9,60 ml × 20 |
Goýmalar
DNK ýa-da RNK izotermiki güýçlendirme üçin.
Saklamak şertleri
Gury buz bilen daşalýar, -25 ~ -15 at derejesinde saklanýar.Frequygy-ýygydan doňdurmakdan gaça duruň, önüm 12 aýlap işleýär.
Protokol
1.Otag temperaturasynda ulanyljak reaksiýa buferini eritiň.Wortex turbalary gysga ýa-da gowy garyşdyrmak üçin birnäçe gezek öwüriň, soňra turbanyň düýbüne suwuklygy ýygnamak üçin sentrifuga.
2.Reaksiýa ulgamyny taýýarlamak.Bu reagent iki reaksiýa ulgamynda, suwuk reaksiýa garyndysynda we lýofilizirlenen ulgam garyndysynda taýýarlanyp bilner.
1) Suwuk reaksiýa garyndysyny taýýarlaň
| Komponent | Ses |
| Aýlawly ara güýçlendiriji bufer (boýag bilen) | 10 μL |
| RT-fermentler garyndysy | 2.8 μL |
| 10 × Primer garyndysya | 5 μL |
| Şablonlar DNK / RNA b | × μL |
| Ucadrosyz suw | 50 μL çenli |
2) Lýofilizasiýa ulgamynyň garyndysy
Ly Lýofilizlenen garyndyny taýýarlaň
| Komponent | Ses |
| Aýlawly ara güýçlendiriji bufer (boýag bilen) | 10 μL |
| Lýofilizlenen goragçy | 20 μL |
| RT-fermentler garyndysy | 2.8 μL |
| Ucadrosyz suw | 50 μL çenli |
② Lýofilizasiýa: Taýýarlanan garyndy 50μL ulgamynda lyofilizasiýa edildi
Reaction Reaksiýa garyndysyny taýýarlaň
| Komponent | Ses |
| Lýofilizlenen garyndy | 1 bölek |
| 10 × Primer garyndysya | 5 μL |
| Şablonlar DNK / RNA b | × μL |
| Ucadrosyz suw | 50 μL çenli |
Bellikler:
1) a.10 × Primer garyndysy: 16 μM FIP / BIP, 2 μM F3 / B3, 4 μM aýlaw F / B;
2) b.DEPC (suwda erän) nuklein kislotasy templ üçin maslahat berilýär.
1.Reňk üýtgemegine görä laýyk uzaldylyp bilinýän 30-45 minut üçin 65 ° C-de inkubasiýa ediň.
2.Nakedalaňaç gözüň pikiriçe, sary polo positiveitel, gyzyl bolsa negatiwdi.
Bellikler
1.Duz bufer turbasynyň düýbünde, worteksde gysga ýa-da otag temperaturasynda gowy garyşmak üçin turbalary birnäçe gezek öwrüp biler.
2.Reaksiýanyň temperaturasy, primerleriň ýagdaýyna görä 62 ℃ bilen 68 between arasynda optimallaşdyrylyp bilner.
3.Gaplanan reagentler uzak wagtlap howada galmaly däldir.
4.Gyzyl we sary reňk reaksiýasy reaksiýa ulgamynyň pH üýtgemegine bagly, ddH ulanmagy maslahat berýän Tris nuklein kislotasyny saklaýan ergini ulanmaň.2O saklanylýan nuklein kislotasy;
5.Synag, reaksiýa ulgamyny taýýarlamak, lýofilizasiýa, nusga gaýtadan işlemek we nusga goşmak prosesi ýaly standartlaşdyrylmalydyr;
6.Hapalanmazlyk üçin, reaksiýa ulgamyny aşa arassa skameýkada, beýleki polo positiveitel päsgelçiliklerden gaça durmak üçin otagyň tüsse kapotyna şablonlary goşmak maslahat berilýär.
