Ultra ýadro
UltraNuclease, DNK ýa-da RNK-ny peseltmäge ukyply, dürli şertlerde iki ýa-da bir hatar, çyzykly ýa-da tegelek, nuklein kislotalaryny 3-5 bazaly uzynlygy bilen 5'-monofosfat oligonukleotidlere doly derejede bölüp bilýän Serratia marcensensinden alnan genetiki ineredenerdendonuklazdyr. .Genetiki in engineeringenerçilik üýtgemeginden soň, önüm fermentirlendi, aňladyldy we arassalanyldy Escherichia coli (E. coli), bu öýjük adatdan daşary we öýjük lizatynyň ylmy gözleglerini peseldýär, şeýle hem proteiniň arassalanyş netijeliligini we funksional gözlegini ýokarlandyrýar.Şeýle hem gen terapiýasynda, wirusy arassalamakda, waksina önümçiliginde, protein we polisakarid derman senagatynda galyndy nuklein kislotasyny aýyrmak reagenti hökmünde ulanylyp bilner.
Önüm aýratynlyklary
| CAS No. | 9025-65-4 |
| EC No. | |
| Molekulýar agram | 30kDa |
| Izoelektrik nokady | 6.85 |
| Beloklaryň arassalygy | ≥99% （SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| Aýratyn işjeňlik | ≥1.1 × 106U / mg |
| OptimumTemperature | 37 ° C. |
| Iň amatly pH | 8.0 |
| ProteaseActivity | otrisatel |
| Bioburden | ＜ 10CFU / 100,000U |
| Öýjükli belok | ≤10ppm |
| Agyr metal | ≤10ppm |
| Bakterial endotoksin | ＜ 0.25EU / 1000U |
| Saklamak buferi | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 ， 20mM NaCl ， 50% gliserol |
Saklamak şertleri
Transportation0 ° C daşaýyş ； -25 ~ -15 ° C Saklamak ， 2 ýyl güýji (doňdurmakdan saklaň).
Bölüm kesgitlemesi
° A260 siňdiriş bahasyny 30 minutyň içinde 37 ° C, pH 8.0 üýtgetmek üçin ulanylýan ferment mukdary, oligonukleotidleri kesip, 37μg losos sperm DNK-syna deňdir, işjeň birlik (U) hökmünde kesgitlenildi.
Hil barlagy
Öýjükli belok: ELISA toplumy
•Proteaz Galyndylar: 250KU / mL UltraNukleýz 60 minut substrat bilen reaksiýa berdi, hiç hili işjeňlik tapylmady.
•Bakterial endotoksin: LAL-Test, Hytaý Halk Respublikasynyň farmakopoeýa 4-nji tom (2020 neşir) gel çäklendiriş usuly.Umumy düzgünler (1143).
•Bioburden: Hytaý Halk Respublikasynyň farmakopoeýasy 4-nji tom (2020-nji ýyl) - Umumy
Önelgesizlik synagynyň düzgünleri (1101), HHR milli standarty, GB 4789.2-2016.
•Agyr metal:ICP-AES, HJ776-2015.
Amal
SDS konsentrasiýasy 0,1% -den ýa-da EDTA-dan ýokary bolanda UltraNuclease işjeňligi ep-esli derejede saklandy
konsentrasiýasy 1mM-den ýokarydy. Surfaktant Triton X- 100, 20 bilen 80 aralygynda nukleaza täsir etmedi.
konsentrasiýasy 1,5% -den pes bolanda häsiýetleri.
| Amal | Iň amatly iş | Dogry amal |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2 + | 1-2mM | 1- 15mM |
| DTT | 0- 100mM | > 100mM |
| 2-Merkaptoetanol | 0- 100mM | > 100mM |
| Monowalent metal iony （Na +, K + we ş.m.） | 0-20mM | 0-200mM |
| PO43- | 0- 10mM | 0- 100mM |
Ulanylyşy we dozasy
• Waksina önümlerinden ekzogen nuklein kislotasyny aýyryň, galyndy nuklein kislotasynyň zäherlenmesini azaldyň we önümiň howpsuzlygyny ýokarlandyryň.
• Nuklein kislotasy sebäpli döreýän iýmit suwuklygynyň ýapyşygyny azaltmak, gaýtadan işlemegiň wagtyny gysgaltmak we belok öndürijiligini ýokarlandyrmak.
• Amatly bölejikleri (wirus, goşma bedeni we ş.m.) örtýän nuklein kislotasyny aýyryň
bölejigiň bölünip çykmagyna we arassalanmagyna.
| Synag görnüşi | Belok öndürmek | Wirus, sanjym | Öýjükli dermanlar |
| Öýjükleriň sany | 1g öýjük çygly agram (10ml bufer bilen üýtgedildi) | 1L fermentasiýa suwuk adatdan daşary | 1L medeniýeti |
| Iň az dozasy | 250U | 100U | 100U |
| Maslahat berilýän doz | 2500U | 25000U | 5000U |
• ucadro bejergisi sütün hromatografiýasy, elektroforez we blot derňewi üçin nusganyň çözgüdini we dikeldilmegini gowulandyryp biler.
• Gen bejergisinde arassalanan adeno bilen baglanyşykly wiruslary almak üçin nuklein kislotasy aýrylýar.
