DNase I.

DNase I (Deoxyribonuclease I), bir ýa-da iki hatar DNK siňdirip bilýän endodeoksiribonukleýzdir.Monodeoksynukleotidleri ýa-da 5 ′ terminalyndaky fosfat toparlary bilen bir ýa-da iki hatar oligodeoksynukleotidleri öndürmek üçin fosfodester baglanyşyklaryny ykrar edýär we ýapýar.DNase I-iň işjeňligi Ca2 + bagly bolup, Mn2 + we Zn2 + ýaly bölünen metal ionlary bilen işjeňleşdirilip bilner.5mM Ca2 + fermenti gidrolizden goraýar.Mg2 + bar bolan ferment, tötänleýin DNK-nyň islendik hataryndaky islendik sahypany tanap we ýapyp bilýärdi.Mn2 + bar bolan ýagdaýynda, iki hatar DNK şol bir ýerde diýen ýaly tanalýar we ýapylýar, tekiz DNK böleklerini ýa-da 1-2 sany nukleotid çykýan ýapyk DNK böleklerini emele getirýär.

Önümiň eýeçiligi

Içegäniň aşgazan asty DNase I hamyrmaýa aňlatma ulgamynda aňladyldy we arassalandy.

Ckomponentleri

Ulag we ammar

1. Saklamagyň durnuklylygy: - saklamak üçin 15 ℃ ~ -25;;

2.Transport durnuklylygy: Buz paketleriniň aşagyndaky ulag;

3. Berlen: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl₂, 50% gliserol, pH 7,6 25 at.

Bölüm kesgitlemesi

Bir birlik, 37 ° C-de 10 minutda 1 µg pBR322 DNK-ny doly peseldýän ferment mukdary hökmünde kesgitlenýär.

Hil barlagy

RNase:37U-da 4 sagatlap 1,6 μg MS2 RNA bilen 5U DNase I, agarose gel elektroforezi bilen kesgitlenişi ýaly peselmeýär.

Bakterial Endotoksin:LAL-synag, Hytaýyň Pharmacopoeia IV 2020 neşirine görä, gel çäklendiriş synag usuly, umumy düzgün (1143).Bakterial endotoksin düzümi ≤10 EU / mg bolmaly.

Ulanmak boýunça görkezmeler

1. Aşakda görkezilen nisbatlara görä RNase-den boş turbada reaksiýa çözgüdini taýýarlaň:

15 minut üçin 2.37;;

3. Reaksiýany duruzmak üçin ýatyryş buferini goşuň we DNase I-ni hereketsizleşdirmek üçin 65 at 10 minutda gyzdyryň. Mysal indiki transkripsiýa synagynda gönüden-göni ulanylyp bilner.

Bellikler

1. RNA üçin 1U DNase I, ýa-da 1μg az RNK üçin 1U DNase I ulanyň.

2. fermentiň hereketsiz wagtynda RNK-nyň zaýalanmagyndan goramak üçin 5 m iň soňky konsentrasiýasyna EDEDTA goşulmaly.