Multiplex qPCR Probe Premix
Pişik belgisi: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Boýag esasly), ýokary duýgurlyk we aýratynlyk bilen häsiýetlendirilen 2 × real wagt mukdarda PCR güýçlendirmek üçin deslapky çözgüt bolup, gök reňkde we nusga goşmagyň täsiri bar.Bu önüm, bir reaksiýada dört floresan mukdarda PCR reaksiýasyny üpjün edýän 2 × Mix öňünden garylan reagentdir.Bu önüm, güýçlendirilen duýgurlygy we aýratynlygy ep-esli ýokarlandyryp, gyzgyn başlaýan Taq fermentine genetiki taýdan üýtgedilen antikor usulyny öz içine alýar.Şol bir wagtyň özünde, bu önüm reaksiýanyň güýçlendirme netijeliligini ýokarlandyryp we pes konsentrasiýa şablonlarynyň täsirli güýçlendirilmegine kömek edip biljek köp reaksiýaly buferi çuňňur optimizirledi.Bu önüm genotip ýazmak we köp sanly mukdar derňewi üçin ulanylyp bilner.
Spesifikasiýa
| Gyzgyn başlangyç | Gurlan gyzgyn başlangyç |
| Ectionüze çykarmak usuly | Esasy gözleg |
| PCR usuly | qPCR |
| Polimeraza | Tak DNK polimeraza |
| Nusganyň görnüşi | DNK |
Saklamak şertleri
Önüm gury buz bilen iberilýär we -25 ~ -15 at derejesinde 2 ýyl saklanyp bilner.
Görkezmeler
1. ReaksiýaUlgam
| Komponentler | Ses (μL) | Jemleýji konsentrasiýa |
| 2 × TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1 × |
| Primer garyndysy (10 olmol / L) a | × | 0,1 - 0,5 olmol / L. |
| Synag garyndysy (10 olmol / L)b | × | 50 - 250 nmol / L. |
| Roks salgylanma boýagy | 0.5 | 1 × |
| Şablon DNK / cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | 25-e çenli | - |
Bellikler:Güýçli titremeden aşa köpürjikleriň öňüni almak üçin ulanmazdan ozal gowy garmaly.
a.Primeriň konsentrasiýasy: “Primer Mix” birnäçe jübüt primeri öz içine alýar, adatça her primer 0,2 μmol / L iň soňky konsentrasiýasynda bolýar we zerur bolanda 0,1 bilen 0,5 olmol / L arasynda sazlanyp bilner.
b.Synagyň konsentrasiýasy: Probe garyndysynda dürli floresan signallary bolan birnäçe zond bar we her zondyň konsentrasiýasy belli bir ýagdaýa görä 50 bilen 250 nmol / L aralygynda sazlanyp bilner.
1.Roks boýag salgylanmasy: Guýularyň arasynda emele gelen floresan signalynyň ýalňyşlygyny düzetmek üçin amaly biosistemalar ýaly Real Time PCR güýçlendiriji guralynda ulanylýar;bu önümde Rox boýag salgylanmasy ýok.Gerek bolsa Cas # 10200 maslahat berilýär.
2.Şablony seýreklemek: qPCR gaty duýgur we şablony ulanmak üçin eritmek maslahat berilýär.Şablon cDNA aksiýa çözgüdi bolsa, şablonyň göwrümi umumy göwrümiň 1/10 böleginden geçmeli däldir.
3.Reaksiýa ulgamy: maksatly gen güýçlendirilmeginiň netijeliligini we gaýtalanmagyny üpjün etmek üçin 25μL, 30μL ýa-da 50 μL maslahat berilýär.
4.Ulgamy taýýarlamak: Örän arassa skameýkada taýýarlaň we maslahatlary we reaksiýa turbalaryny ýadro galyndysy bolmazdan ulanyň;maslahatlary süzgüçli patronlar bilen ulanmak maslahat berilýär.Haç hapalanmagyndan we aerozol hapalanmagyndan gaça duruň.
2.Reaksiýa programmasy
| Sikl ädimi | Temp. | Wagt | Sikller |
| Başlangyç denaturasiýa | 95 ℃ | 5min | 1 |
| Denaturasiýa | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Annealing / Giňeldiş | 60 ℃ | 30 sek |
Bellikler:
1.Annealing / Extension: Temperatura we wagt dizaýn asty Tm bahasyna görä laýyk sazlanyp bilner.
2.Floresan signalyny almak: Dürli qPCR kesgitleýiş gurallary üçin zerur bolan floresan signalyny almagyň wagty başga, iň az wagt çägine görä belläň.Birnäçe umumy gurallaryň wagty aşakdaky ýaly kesgitlenýär:
20 sek: Amaly biosistemalar 7700, 7900HT, 7500 Çalt
31 sek: Amaly biosistemalar 7300
32 sek: Amaly biosistemalar 7500
Bellikler
Saglygyňyzy we howpsuzlygyňyzy üpjün etmek üçin zerur PPE, şeýle laboratoriýa palto we ellik geýiň!
