Fosfataz aşgazany (ALP)
Düşündiriş
Alkogolly fosfataz, TAB5 genini göterýän rekombinant E. coli ştamyndan emele gelýär.Ferment, DNK we RNK fosfomonoesterleriniň 5´ we 3´ uçlarynyň deposforilýasiýasyny katalizleýär.Şeýle hem, ribozany, şeýle hem deoksiribonukleozid trifosfatlary (NTP we dNTP) gidrolizleýär.TAB5 Alkalin fosfataz 5´ uzyn, 5´ çyzylan we gödek uçlarda hereket edýär.Fosfataz DNK ýa-da RNK-nyň fosforlyatirlenen uçlaryny aýyrmak üçin klonlaşdyrmak ýa-da zondyň belgisi ýaly köp molekulýar biologiýa programmalarynda ulanylyp bilner.Klonirleme synaglarynda, deposforilýasiýa çyzykly plazmaid DNK-nyň öz-özüni ýapmagynyň öňüni alýar.Şeýle hem, DNK yzygiderliligi üçin bir şablon taýýarlamak üçin PCR reaksiýalarynda birleşdirilmedik dNTP-leri peseldip biler.Ferment 70 ° C-de 5 minut gyzdyryp, doly we yzyna gaýtaryp bolmajak hereketsiz bolýar, şeýlelik bilen fosfatazany baglamazdan ozal aýyrýar ýa-da gereksiz bellik edýär.
Ulanylyşy
1. Beloklar (antikorlar, streptawidin we ş.m.) bilen birleşdirilen alkalin fosfataz, maksat molekulalaryny ýörite kesgitläp biler we ELISA, WB we gistohimiki tapyndylarda ulanylyp bilner;
2.Alkalin fosfataz, öz-özüňi baglanyşdyrmazlyk üçin DNK ýa-da RNK-nyň 5 'terminalyny fosforlaşdyrmak üçin ulanylyp bilner;
3. aboveokardaky deposforirlenen DNK ýa-da RNK radio bellikli fosfatlar bilen bellik edilip bilner (T4 poli-nukleotid kinazyň üsti bilen)
Himiki gurluşy
Spesifikasiýa
| Synag elementleri | Aýratynlyklary |
| Fermentleriň işjeňligi | 5U / μL |
| Endonukleýz işjeňligi | Tapylmady |
| Exonuuclease işjeňligi | Tapylmady |
| Niklemek işi | Tapylmady |
| RNase işjeňligi | Tapylmady |
| E.coli DNK | Oc1kopiýa / 5U |
| Endotoksin | LAL-synag, ≤10EU / mg |
| Arassalyk | ≥95% |
Ulag we ammar
Ulag:AmbIent
Saklama:2-8 ° C derejesinde saklaň
Gaýtadan synamak maslahat berilýärDurmuş:2 ýyl
