Rnase A.
Ribonukleý A (RNaseA), molekulýar agramy takmynan 13,7 kDa bolan 4 sany disulfid baglanyşygyny öz içine alýan bir hatar polipeptiddir.RNase Ais, C we U galyndylarynda bir hatar RNK-ny aýratyn peseldýän endoribonukleýz.Hususan-da, bölünişik, bir nukleotidiň 5'-ribozasy we fosfat topary bilen goňşy pirimidin nukleotidiniň 3'-ribozasynda emele gelen fosfodester baglanyşygyny ykrar edýär, şonuň üçin 2,3'-siklik fosfatlar degişli 3-e gidroliz edilýär. 'nukleozid fosfatlar (mysal üçin, pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp we A-PG döretmek üçin RNase A tarapyndan ýapylýar).RNase A, bir hatar RNK-ny bölmekde iň işjeňdir.Maslahat berilýän iş konsentrasiýasy dürli reaksiýa ulgamlaryna laýyk gelýän 1- 100 μ G / mL.Az duzly konsentrasiýa (0-100 mM NaCl), bir hatar RNK, iki hatar RNK we RNK-DNK gibridizasiýasy netijesinde emele gelen RNK zynjyrlaryny kesmek üçin ulanylyp bilner.
Şeýle-de bolsa, duzuň ýokary konsentrasiýasynda (≥0.3 M), RNase A diňe bir hatar RNK-ny ýörite ýapýar.
RNase A, köplenç plazmid DNK ýa-da genom DNK taýýarlanylanda RNK-ny aýyrmak üçin ulanylýar.DNase taýýarlyk döwründe işjeňmi ýa-da ýokmy, reaksiýa aňsatlyk bilen täsir edip biler.DNase işjeňligini hereketsizleşdirmek üçin suw wannasynda gaýnatmagyň adaty usuly ulanylyp bilner.Bu önümde DNase we proteaz ýok we ulanmazdan ozal ýylylyk bejergisini talap etmeýär.Mundan başga-da, bu önüm RNase gorag derňewi we RNK yzygiderliligi derňewi ýaly molekulýar biologiýa synaglarynda hem ulanylyp bilner.
Saklamak şertleri
Önüm 2 ýyl üçin -25 ℃ ~ - 15 at derejesinde saklanmalydyr.
Aýratynlyklary
| Daş görnüşi | Poroşok |
| Mukdar | 100mg / 1g |
| Haryt görnüşi | RNase A. |
Görkezmeler
Bu, RNase A saklaýyş çözgüdini taýýarlamagyň umumy usullaryndan biridir.Şeýle hem taýýarlanyp bilnerlaboratoriýada ýa-da salgylanma edebiýatynda adaty usullara laýyklykda beýleki usullar bilen10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ýa-da Tris-NaCl ergininde göni ereýär)
1. 10 mg / ml RNase A saklaýyş erginini taýýarlamak üçin 10 m natriý asetat (pH 5.2) ulanyň.
2. 100 at 15 minutda gyzdyrmak.
3. Otag otagynyň temperaturasyna sowadyň, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) 1/10 göwrüm goşuň, pH-ni 7,4-e sazlaň (üçinmysal üçin, 500 ml 10 mg / mL RNase saklaýjy ergin 1 M Tris-HCl, pH7.4 goşuň).
4. 2 ýyla çenli durnukly bolup bilýän doňdurylan ammar üçin -20 at-da gaplanan.
[Bellikler]:
Bitarap şertlerde RNaseA ergini gaýnanda, RNase ýagyşy emele geler;Has pes pH-de gaýnadyň we ýagyş bar bolsa, belok hapalarynyň bolmagy sebäpli döräp biler.Gaýnandan soň çökündiler tapylsa, ýokary tizlikli sentrifugasiýa (13000 rpm) bilen hapalar aýrylyp, doňdurmak üçin kiçi gaplanyp bilner.
Bellikler
Saglygyňyzy we howpsuzlygyňyzy üpjün etmek üçin zerur PPE, şeýle laboratoriýa palto we ellik geýiň.
