Rnase A.
Ribonukleý A (RNaseA), molekulýar agramy takmynan 13,7 kDa bolan 4 sany disulfid baglanyşygyny öz içine alýan bir hatar polipeptiddir.RNase A, C we U galyndylarynda bir hatar RNK-ny aýratyn peseldýän endoribonukleýdir.Hususan-da, bölünişik, bir nukleotidiň 5′-ribozasy we fosfat topary bilen goňşy pirimidin nukleotidiniň 3 ′ ribozasynda emele gelen fosfodester baglanyşygyny ykrar edýär, şonuň üçin 2, 3′-siklik fosfatlar degişli 3-e gidroliz edilýär. Uc nukleozid fosfatlar (mysal üçin pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp we A-PG öndürmek üçin RNase A tarapyndan ýapylýar).RNase A, bir hatar RNK-ny bölmekde iň işjeňdir.Maslahat berilýän iş konsentrasiýasy dürli reaksiýa ulgamlaryna laýyk gelýän 1-100μG / mL.Az duzly konsentrasiýa (0-100 mM NaCl), bir hatar RNK, iki hatar RNK we RNK-DNK gibridizasiýasy netijesinde emele gelen RNK zynjyrlaryny kesmek üçin ulanylyp bilner.Şeýle-de bolsa, duzuň ýokary konsentrasiýasynda (≥0.3 M), RNase A diňe bir hatar RNK-ny ýörite ýapýar.
RNase A, köplenç plazmid DNK ýa-da genom DNK taýýarlanylanda RNK-ny aýyrmak üçin ulanylýar. DNase taýýarlyk döwründe işjeň ýa-da ýok bolsa, reaksiýa aňsat täsir edip biler.DNase işjeňligini hereketsizleşdirmek üçin suw wannasynda gaýnatmagyň adaty usuly ulanylyp bilner.Bu önümde DNase we proteaz ýok we ulanmazdan ozal ýylylyk bejergisini talap etmeýär.Mundan başga-da, bu önüm RNase gorag derňewi we RNK yzygiderliligi derňewi ýaly molekulýar biologiýa synaglarynda hem ulanylyp bilner.
Saklamak şertleri
Önüm 2 ýyl güýji bolan -25 ～ -15 at derejesinde saklanyp bilner.
Görkezmeler
Bu, RNase A saklaýyş çözgüdini taýýarlamagyň umumy usullaryndan biridir.Şeýle hem taýýarlanyp bilnerlaboratoriýada ýa-da salgylanma edebiýatynda adaty usullara laýyklykda beýleki usullar10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ýa-da Tris-NaCl ergininde göni ereýär)
1. 10 mg / ml RNase A saklaýyş erginini taýýarlamak üçin 10 m natriý asetat (pH 5.2) ulanyň
2. 100 at 15 minutda gyzdyrmak
3. Otag otagynyň temperaturasyna sowadyň, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) 1/10 göwrüm goşuň, pH-ni 7,4-e sazlaň (üçinmysal üçin, 500 ml 10g / ml RNase saklaýjy ergin 1M Tris-HCL, PH7.4 goşuň)
4. 2 ýyla çenli durnukly bolup bilýän doňdurylan ammar üçin -20 at-da gaplanan.
[Bellikler]: Bitarap şertlerde RNaseA erginini gaýnadanda, RNase ýagyşy emele geler;Has pes pH-de gaýnadyň we ýagyş bar bolsa, belok hapalarynyň bolmagy sebäpli döräp biler.Gaýnandan soň çökündiler tapylsa, ýokary tizlikli sentrifugasiýa (13000 rpm) bilen hapalar aýrylyp, doňdurmak üçin kiçi gaplanyp bilner.
Haryt maglumatlary
| Sinonimler | Ribonukleýz I;Aşgazan asty mäziniň ribonukleýasy;Ribonukleý 3'-pirimidnooligonukleotidohidrolaza;Rnase A;Endoribonulcease I. |
| CAS No. | 9001-99-4 |
| Daş görnüşi | Ak lyofilizlenen poroşok |
| Molekulýar agram | .7 13,7kDa (aminokislotanyň yzygiderliligi) |
| Ph bahasy | 7.6 (işjeňlik aralygy 6-10) |
| Amatly temperatura | 60 ℃ (Iş aralygy 15-70 ℃) |
| Işleýän agent | Na2+.K.+ |
| Inhibitor | Rnase inhibitory |
| Işlemezlik usuly | Heatingyladyş bilen hereketsiz bolup bilmeýär, sentrifuga sütünini ulanmak maslahat berilýär |
| Gelip çykyşy | Bovine |
| Çözüw | Suwda ereýär (10mg / ml) |
| Gury ýerde ýitgi | ≤5.0% |
| Fermentleriň işjeňligi | ≥60 Kunitz birlikleri / mg |
| Izoelektrik nokady | 9.6 |
Bellikler
Howpsuzlygyňyz we saglygyňyz üçin laboratoriýa palto we bir gezek ulanylýan ellik geýiň.
