Robustart Taq DNK polimeraza

Robustart Taq DNK polimeraza gyzgyn başlangyç DNK polimeraza.Bu önüm, diňe PCR ulgamyny taýýarlamak we güýçlendirmek prosesinde primerleriň ýöriteleşdirilmezligi ýa-da primer agregasiýasy sebäpli ýüze çykýan aýratyn reaksiýany has gowy saklap bilmez.Şol sebäpli, ajaýyp aýratynlygy bar we pes konsentrasiýa şablonlaryny güýçlendirmek üçin has täsirli we köpsanly PCR güýçlendirme reaksiýasy üçin amatly.Mundan başga-da, bu önümiň gaty oňat ulanylyşy bar we PCR reaksiýalarynyň dürli görnüşlerinde durnukly güýçlendirme netijeleri alyp bolýar.

Komponentler

1.5 U / μL Robustart Taq DNK polimeraza

2.10 × PCR Bufer II (Mg² + mugt) (islege görä)

3.25 mM MgCl₂(islege görä)

* 10 × PCR Buffer II (Mg² + mugt) dNTP we Mg² + ýok, dNTP we MgCl goşmagyňyzy haýyş edýäris₂reaksiýa ulgamyny taýýarlanda.

Maslahat berilýän programmalar

1.Çalt güýçlendirmek.

2.Birnäçe güýçlendirme.

3.Ganyň, çişleriň we beýleki nusgalaryň göni güýçlendirilmegi.

4.Dem alyş ýollarynyň kesellerini anyklamak.

Saklamak ýagdaýy

Uzak möhletli saklamak üçin -20 ° C, ulanmazdan ozal gowy garmaly, ýygy-ýygydan doňmakdan saklanmaly.

* Sowadyjydan soň ýagyş ýüze çyksa, adaty zat;garyşdyrmazdan we ulanmazdan ozal otag temperaturasyna deňleşdirmek maslahat berilýär.

Bölüm kesgitlemesi

Bir işjeň birlik (U), 10 nmol deoksiribonukleotidiň 74 ° C-de kislota-eräp bilmeýän materialyna 30 minutda işjeňleşdirilen losos sperm DNK-ny şablon / primer hökmünde öz içine alýan fermentiň mukdary hökmünde kesgitlenilýär.

Hil barlagy

1.SDS-PAGE elektroforetiki arassalygy 98% -den ýokary.

2.Güýçlendirmek duýgurlygy, partiýa-partiýa gözegçilik, durnuklylyk.

3.Hiç hili ekzogen ýadro işjeňligi, ekzogen endonukleýz ýa-da ekzonukleýz hapalanmasy ýok

Görkezmeler

Reaksiýa gurmak

Bellikler:

1) a.Buferde dNTP we Mg² + ýok, dNTP we MgCl goşmagyňyzy haýyş edýäris₂reaksiýa ulgamyny taýýarlanda.

2) b.QPCR / qRT-PCR üçin ulanylsa, reaksiýa ulgamyna floresan zondlar goşulmalydyr.Adatça, 0,2 μM jemleýji başlangyç konsentrasiýasy gowy netijeler berer;reaksiýanyň öndürijiligi pes bolsa, deslapky konsentrasiýa 0,2-1 MM aralygynda sazlanyp bilner.Synagyň konsentrasiýasy adatça 0,1-0,3 μM aralygynda optimallaşdyrylýar.Primer bilen zondyň iň gowy kombinasiýasyny tapmak üçin konsentrasiýa gradient synaglary geçirilip bilner.

Malylylyk welosiped protokoly

Bellikler

1.Çalt DNK polimerazynyň güýçlendiriş tizligi 1 kb / 10 s-den pes bolmaly däldir.Temperaturanyň ýokarlanmagy we düşmegi, temperatura gözegçilik tertibi we dürli PCR gurallarynyň ýylylyk geçirijilik netijeliligi dürli-dürli bolýar, şonuň üçin belli bir çalt PCR guraly üçin optimal reaksiýa şertlerini optimizirlemek maslahat berilýär.

2.Ulgam has ýokary uýgunlaşdyrylan, has ýokary aýratynlygy we duýgurlygy bilen.

3.Highokary duýgurlyk PCR kesgitleýji reagentleri hökmünde ulanmak üçin amatly we köpsanly PCR güýçlendirme reaksiýalarynda ulanylyp bilner.

4.5 ′ → 3 ′ polimeraza işjeňligi, 5 ′ → 3 ′ ekzonukleýasiýa işjeňligi;3 ′ → 5 ′ eksonukleýasiýa işjeňligi ýok;gözden geçiriş funksiýasy ýok.

5.PCR we RT-PCR-iň hil we mukdar synagy üçin amatly.

6.PCR önüminiň 3 ′ ujy, T wektoryna göni klonlaşdyrylyp bilinýän A.

7.Üç basgançakly pes pes temperaturaly primerler ýa-da 200 at güýjünden köp bölekleri güýçlendirmek üçin maslahat berilýär.