Univershliumumy SYBR REaşyl qPCR Premiks (Gök)

Pişik belgisi: HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Boýag esasly), ýokary duýgurlyk we aýratynlyk bilen häsiýetlendirilen, 2 × real wagt mukdarda PCR güýçlendirmek üçin deslapky çözgüt bolup, gök reňkde bolýar we goşmaça gözleg täsirine eýe.Esasy komponent Taq DNK polimerazasy, nusga taýýarlanylanda deslapky anneal sebäpli belli bolmadyk güýçlendirmäni netijeli saklamak üçin antikor gyzgyn başlangyjy ulanýar.Şol bir wagtyň özünde, formula PCR reaksiýasynyň güýçlendirme netijeliligini ýokarlandyrmak we genleriň güýçlendirilmegini dürli GC mazmuny (30 ~ 70%) bilen deňleşdirmek üçin öňe sürýän faktorlary goşýar, şonuň üçin mukdar PCR giň mukdarda gowy çyzykly gatnaşyk gazanyp biler. sebiti.Bu önümde qPCR gurallarynyň köpüsine ulanylýan ýörite ROX Passiw salgylanma boýagy bar.Dürli gurallarda ROX konsentrasiýasyny sazlamak hökman däl.Güýçlendirmek üçin reaksiýa ulgamyny taýýarlamak üçin diňe primer we şablonlary goşmak zerur.

Komponentler

Universal Blue qPCR Master Mix

Saklamak şertleri

Önüm buz paketleri bilen iberilýär we -25 ℃ ~ -15 at 18 aý saklanyp bilner.Reaksiýa ulgamyny saklanyňyzda ýa-da taýýarlanyňyzda güýçli ýagtylyk şöhlelenmesinden gaça durmaly.

Spesifikasiýa

Görkezmeler

1.Raksiýa ulgamy

[Bellik]: Güýçli titremeden aşa köpürjikleriň öňüni almak üçin ulanmazdan ozal gowy garmaly.

a) Esasy konsentrasiýa: Iň soňky konsentrasiýa 0,2μmol / L, şeýle hem zerur bolanda 0,1 bilen 1.0μmol / L arasynda sazlanyp bilner.

b) Şablonyň konsentrasiýasy: Şablon arassalanmadyk cDNA aksiýa çözgüdi bolsa, ulanylýan ses qPCR reaksiýasynyň umumy göwrüminiň 1/10 böleginden geçmeli däldir.

ç) Şablony seýreklemek: cDNA aksiýa erginini 5-10 esse azaltmak maslahat berilýär.Goşulan şablonyň iň amatly mukdary güýçlendirmek arkaly alnan Ct bahasy 20-30 aýlaw bolanda has gowudyr.

d) Reaksiýa ulgamy: Maksatly gen güýçlendirmegiň netijeliligini we gaýtalanmagyny üpjün etmek üçin 20μL ýa-da 50μL ulanmak maslahat berilýär.

e) Ulgamy taýýarlamak: Örän arassa skameýkada taýýarlaň we maslahatlary we reaksiýa turbalaryny ýadro galyndysy bolmazdan ulanyň;maslahatlary süzgüçli patronlar bilen ulanmak maslahat berilýär.Haç hapalanmagyndan we aerozol hapalanmagyndan gaça duruň.

2.Reaksiýa programmasy

Standart maksatnama

Çalt programma

[Bellik]: Çalt programma genleriň köpüsi üçin amatly we adaty programmalar aýratyn çylşyrymly ikinji gurluş genleri üçin synag edilip bilner.

a) Annealing temperaturasy we wagty: Astaryň we maksatly geniň uzynlygyna görä sazlaň.

b) Floresan signalyny almak (★): Synag amalyny guraly ulanmak boýunça görkezmelerdäki talaplara laýyklykda belläň.

ç) Eremegiň egrisi: Guralyň deslapky programmasy adaty ulanylyp bilner.

3. Netijeleriň derňewi 

San taýdan synaglar üçin azyndan üç sany biologiki köpeltmek gerekdi.Reaksiýadan soň güýçlendiriji egrini we ereýän egrini tassyklamaly.

3.1 Güýçlendirmek egrisi:

Adaty güýçlendirme egrisi S görnüşli.San taýdan derňew Ct bahasy 20 bilen 30 aralygynda düşende has takyk bolýar. Ct bahasy 10-dan pes bolsa, şablony eritmeli we gaýtadan synag geçirmeli.Ct bahasy 30-35 aralygynda bolanda, güýçlendirme netijeliligini ýokarlandyrmak we netijeleriň derňewiniň takyklygyny üpjün etmek üçin şablonyň konsentrasiýasyny ýa-da reaksiýa ulgamynyň göwrümini ýokarlandyrmaly.Ct bahasy 35-den ýokary bolsa, synag netijeleri geniň aňlatmasyny mukdar taýdan analiz edip bilmeýär, ýöne hil derňewi üçin ulanylyp bilner.

3.2 Ereýän egri:

Ereýän egriniň ýekeje pikiri reaksiýa aýratynlygynyň gowydygyny we mukdar taýdan derňewiň edilip bilinjekdigini görkezýär;ereýän egrilik goşa ýa-da birnäçe pikiri görkezýän bolsa, mukdar derňewi edip bolmaz.Ereýän egrilik goşa pikleri görkezýär we maksat däl pikiň başlangyç ölçegdigini ýa-da DNK agarose gel elektroforezi tarapyndan güýçlendirilmedikdigini kesgitlemek zerur.Eger deslapky ölçeg bolsa, primeriň konsentrasiýasyny azaltmak ýa-da ýokary güýçlendiriji netijeliligi bilen primerleri täzeden dizaýn etmek maslahat berilýär.Specificörite däl güýçlendirme bolsa, gyzdyrma temperaturasyny ýokarlandyrmagyňyzy ýa-da desgalary aýratynlyk bilen täzeden düzmegiňizi haýyş edýäris.

Bellikler

Saglygyňyzy we howpsuzlygyňyzy üpjün etmek üçin zerur PPE, şeýle laboratoriýa palto we ellik geýiň

Bu önüm diňe gözleg üçin ulanylýar！