2 × HiF Taq plus Master Mix
Pişik belgisi: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (Boýag bilen), Plus HIF DNA polimeraza, dNTP we optimal bufer öz içine alýan 2 × deslapky çözgüt.Polimeraza işjeňligini we 3 ′ → 5′exonukleý işjeňligini saklaýan otag temperaturasynda iki monoklonal antikor, aňsat we ýokary aýratyn Hot Start PCR üçin baş garyndysyna goşulýar.Fermente uzyn bölek güýçlendiriji kuwwat bermek üçin güýçlendiriji faktor goşulýar, güýçlendirmegiň uzynlygy 13 kb çenli bolup biler, fermentiň 5 ′ → 3 ′ DNK polimeraza işjeňligi we 3 ′ → 5 ′ ekzonukleý işjeňligi, wepalylygy Taq DNK polimerazasyndan 83 esse, adaty DNK polimerazasyndan 9 esse köpdür.Çylşyrymly şablonlary güýçlendirmek üçin amatly, güýçlendiriji önüm gödek gutarýar.
2 × HIF Taq plus Master Mix (Boýag bilen) çalt we aňsat, ýokary duýgurlyk, güýçli aýratynlyk, gowy durnuklylyk we ş.m. artykmaçlyklara eýedir, reaksiýa ulgamy diňe primerleri we şablonlary goşmaly we iki bilen güýçlendirilip bilner. ädim protokoly, synag ädimlerini ýönekeýleşdirmek we wagt tygşytlamak.Bu önümde elektroforez görkeziji boýaglar bar we PCR önümleri göni elektroforez üçin ulanylyp bilner.Mundan başga-da, önümiň garyndysy birnäçe gezek doňdurylandan soň durnukly işjeňligi saklap biler ýaly, belli bir gorag serişdesini hem öz içine alýar.
Saklamak şertleri
Önümler -25 ~ -15 at 1 ýyl saklanmalydyr.
Aýratynlyklary
Önümiň spesifikasiýasy | Master Mix |
Konsentrasiýa | 2 × |
Gyzgyn başlangyç | Gurlan gyzgyn başlangyç |
Üýtgetmek | Gödek |
Reaksiýanyň tizligi | Çalt |
Ölçegi (Jemleýji önüm) | 13kb çenli |
Ulag üçin şertler | Gury buz |
Haryt görnüşi | Fokary wepaly PCR premiksleri |
Görkezmeler
1.PCR reaksiýa ulgamy
Komponentler | Ses (μL) |
DNK şablony | Amatly |
Öňe iberiji (10 olmol / L) | 2.5 |
Ters primer (10 olmol / L) | 2.5 |
2 × HIF Taq plus Master Mix | 25 |
ddH2O | 50-e çenli |
2.Dürli şablonlary ulanmak maslahat berilýär
Şablonyň görnüşi | Bölekleri 1kb-dan 10 kb-a çenli güýçlendiriň |
Genomiki DNK | 50ng-200 ng |
Plazmid ýa-da wirus DNK | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (PCR reaksiýanyň soňky göwrüminiň 10% -inden geçmäň) |
3.Güýçlendirmek teswirnamasy
1) Iki basgançakly teswirnama (çylşyrymly şablon)
Sikl ädimi | Temp. | Wagt | Sikller |
Başlangyç denaturasiýa | 98 ℃ | 3 min | 1 |
Denaturasiýa | 98 ℃ | 10 sek | 30-35 |
Giňeldiş | 68 ℃ | 30 sek / kb | |
Jemleýji giňeltme | 72 ℃ | 5 min | 1 |
2) Üç basgançakly teswirnama (yzygiderli protokol)
Sikl ädimi | Temp. | Wagt | Sikller |
Başlangyç denaturasiýa | 98 ℃ | 3 min | 1 |
Denaturasiýa | 98 ℃ | 10 sek | 30-35 |
Annealing | 60 ℃ | 20 sek | |
Giňeldiş | 72 ℃ | 30 sek / kb | |
Jemleýji giňeltme | 72 ℃ | 5 min | 1 |
3) Annealing Gradient Protocol (çylşyrymly şablon)
Sikl ädimi | Temperatura | Wagt | Sikller |
Başlangyç denaturasiýa | 98 ℃ | 3 min | 1 |
Denaturasiýa | 98 ℃ | 10 sek | 15 (1 cycle her sikl üçin azaltmak) |
Gradient annealing | 70-55 ℃ | 20 sek | |
Giňeldiş | 72 ℃ | 30 sek / kb | |
Denaturasiýa | 98 ℃ | 10 sek |
20 |
Annealing | 55 ℃ | 20 sek | |
Giňeldiş | 72 ℃ | 30 sek / kb | |
Jemleýji giňeltme | 72 ℃ | 5 min | 1 |
Dürli güýçlendirme protokolynyň aýratynlyklary
Protokoll | Iki ädimli | Üç basgançakly | Gradient annealing |
Görnüş. | çalt | orta | haýal |
Aýratynlygy | beýik | orta | beýik |
PCR hasyllylygy | orta | beýik | orta |
Ectionüze çykarmak derejesi | beýik | orta | beýik |
Bellikler
Saglygyňyzy we howpsuzlygyňyzy üpjün etmek üçin zerur PPE, şeýle laboratoriýa palto we ellik geýiň!