Bir ädim RT-qPCR SYBR Greenaşyl premiks
Pişik belgisi: HCB5140A
Bir ädim RT-qPCR Syber Green Premix, SYBR Green I boýagynyň esasynda floresan mukdary üçin.Genlere mahsus primerleri ulanmak, ters transkripsiýa we qPCR reaksiýalary bir turbada tamamlanýar, gapagy açmak we turba geçiriji amallaryň zerurlygyny aradan aýyrýar, analiziň netijeliligini ep-esli ýokarlandyrýar we hapalanmak töwekgelçiligini azaldýar.RNK nusgalary üçin toplumda netijeli cDNA sintezi üçin ýylylyga çydamly ters transkriptaz we mukdar güýçlendirmek üçin HotStart Taq DNA polimerazasy ulanylýar.Optimallaşdyrylan bufer ulgamynyň çäginde, toplumyň duýgurlygy ýokary derejede görkezilen nyşanlar üçin 0,1 pg, ortaça beýan edilen nyşanlar üçin 1 pg çenli bolup biler.Kitap DNK nusgalaryny güýçlendirmek we mukdar taýdan kesgitlemek üçin amatlydyr.Dürli ösümlik we haýwan nusgalaryndan, öýjüklerden we mikroorganizmlerden nuklein kislotalaryny duýgur tapmaga we mukdarda kesgitlemäge mümkinçilik berýär.
Komponentler
| No | Ady | Ses | Ses |
| 1 | Ösen bufer | 250 μL | 2 × 1,25 ml |
| 2 | Ösen ferment garyndysy | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase mugt H.2O | 250 μL | 2 × 1,25 ml |
Saklamak şertleri
Bu önüm 1 ýyl ýagtylykdan -25 ~ -15 ℃ uzaklykda saklanmalydyr.
Görkezmeler
1.Raksiýa ulgamynyň konfigurasiýasyd
| Komponentler | Ses (μL) | Ses (μL) | Ahyrky konsentrasiýa |
| Ösen bufer | 12.5 | 25 | 1 × |
| Ösen ferment garyndysy | 1 | 2 | - |
| Forward Primer (10 olmol / L)a | 0.5 | 1 | 0,2 olmol / L. |
| Ters primer (10 olmol / L)a | 0.5 | 1 | 0,2 olmol / L. |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase mugt H.2O.c | 25-e çenli | 50-e çenli | - |
Bellikler:
1) a.T.iň soňky başlangyç konsentrasiýasy 0,2 μmol / L boldy, bu hem zerur bolanda 0,1 bilen 1μmol / L arasynda sazlanyp bilner.
2) b.Reagent aşa duýgur, Total RNA 1pg-1μg diapazonda we adam nusgalarynyň synagynda 1 Cg-100 ng iň amatly giriş görkezildi, umumy Ct bahasyna 15-30 aralygynda gözegçilik edilýär.
3) c.Maksatly gen güýçlendirilişiniň dogrulygyny we köpelmegini üpjün etmek üçin 20μL ýa-da 50μL ulanmak maslahat berilýär.
4) d.Ultra arassa skameýkada taýýarlaň we nukleuz galyndysyz maslahatlary we reaksiýa turbalaryny ulanyň;süzgüçli patronlar bilen maslahat berilýär.Haç hapalanmagyndan we aerozol hapalanmagyndan gaça duruň.
2.Reaksiýa programmasy
| Sikl ädimi | Temp. | Wagt | Sikller |
| Tersine transkripsiýa | 50 ℃a | 6min | 1 |
| Başlangyç denaturasiýa | 95 ℃ | 5min | 1 |
| Güýçlendirmek reaksiýasy | 95 ℃ | 15 sek | 40 |
| 60 ℃b | 30 sek | ||
| Eremegiň egrisi | Gural kemçilikleri | 1 | |
Bellikler:
1) a.Tersine transkripsiýa temperaturasy, tejribe zerurlyklaryna görä 50-55 ° C aralygynda saýlanyp bilner.DNK nusgalary üçin ters transkripsiýa prosesi aýrylyp bilner.
2) b.Specialörite ýagdaýlarda, gyzdyryjy / uzaldyş temperaturasy esasy Tm bahasyna görä sazlanyp bilner, 60 ° C maslahat berilýär.
Bellikler
1. Bu önüm diňe gözleg üçin ulanylýar.
2. Howpsuzlygyňyz üçin laboratoriýa palto we bir gezek ulanylýan ellikler bilen işlemegiňizi haýyş edýäris.
