Wirus DNK / RNK çykarmak toplumy
Bu toplum ýokary arassa wirusly DNK / RNK-ny nazofargeal çişler, daşky gurşaw çişleri, öýjük medeniýeti adatdan daşary hadysalary we dokumanyň birmeňzeş supernatantlary ýaly nusgalardan çalt çykarmak üçin amatlydyr.Toplum, ýokary hilli wirus DNK / RNK çykarmak üçin fenol / hloroform organiki erginleri ýa-da köp wagt talap edýän alkogol ýagyşlaryny ulanmak zerurlygyny aradan aýyrýan kremniniň membranany arassalamak tehnologiýasyna esaslanýar.Alnan nuklein kislotalary hapalardan azat we ters transkripsiýa, PCR, RT-PCR, real wagt PCR, indiki nesil yzygiderliligi (NGS) we Demirgazyk blot ýaly aşaky synaglarda ulanmaga taýyn.
Saklamak şertleri
15 ~ 25 at derejesinde saklaň we otag temperaturasynda daşaň
Komponentler
| Komponentler | 100RXNS |
| Bufer VL | 50 ml |
| Bufer RW | 120 ml |
| RNase-ddH2 O. | 6 ml |
| FastPure RNA sütünleri | 100 |
| Kolleksiýa turbalary (2ml) | 100 |
| RNase mugt kolleksiýa turbalary (1 .5ml) | 100 |
Bufer VL:Liz we baglanyşyk üçin gurşaw üpjün ediň.
Bufer RW:Galyndy beloklary we beýleki hapalary aýyryň.
RNase-ddH2O:Aýlaw sütünindäki membranadan DNK / RNK-ny saýlaň.
FastPure RNA sütünleri:Aýratynam DNK / RNK-ny adsorb edýär.
Kolleksiýa turbalary 2 ml:Süzgüç ýygnaň.
“RNase” kolleksiýa turbalary 1,5 ml:DNK / RNK ýygnaň.
Goýmalar
Nasofargeal çişler, daşky gurşaw çişleri, öýjük medeniýeti adatdan daşary hadysalar we dokumalar birmeňzeş supernatantlar.
Özbaşdak taýýarlanan Materials
RNase-den erkin turbageçiriji maslahatlar, 1,5 ml RNase-den merkezden gaçyryş turbalary, sentrifuga, worteks mikser we turbalar.
Synag prosesi
Aşakdaky ädimleriň hemmesini biosfera kabinetinde ýerine ýetiriň.
1. RNase-den erkin sentrifuga turbasyna 200 μl nusga goşuň (ýeterlik bolmadyk ýagdaýynda PBS ýa-da 0.9% NaCl düzüň), 500 μl Buffer VL goşuň, 15-30 sekuntda worteksing bilen gowy garyşdyryň we sentrifuga turbanyň düýbündäki garyndyny gysgaça ýygnamak.
2. “FastPure RNA” sütünlerini kolleksiýa turbalaryna 2 ml goýuň.Garyndyny 1-nji ädimden FastPure RNA sütünlerine, 12,000 aýlawda (13,400 × g) sentrifuga 1 minut geçiriň we süzgüçden çykaryň.
3. FastPure RNA sütünlerine 600 μl Buffer RW, 12,000 aýlawda (13,400 × g) 30 sekuntda sentrifuga goşuň we süzgüçden çykaryň.
4. 3-nji ädimi gaýtalaň.
5. Boş sütüni 12,000 aýlawda (13,400 × g) 2 minutda merkezden gaçyryň.
6. “FastPure RNA” sütünlerini seresaplylyk bilen täze “RNase” kolleksiýa turbalaryna 1,5 ml (toplumda berilýär) geçiriň we sütüne degmän membrananyň merkezine 30 - 50 μl RNase erkin ddH2O goşuň.Otagyň temperaturasynda 1 minut, sentrifuga 12,000 aýlawda (13,400 × g) 1 minut durmaga rugsat beriň.
7. FastPure RNA sütünlerini taşlaň.DNK / RNA indiki barlaglar üçin gönüden-göni ulanylyp bilner ýa-da gysga wagtyň dowamynda -30 ~ -15 ° C ýa-da has uzak wagtlap -85 ~ -65 ° C derejesinde saklanyp bilner.
Bellikler
Gözleg üçin diňe ulanyň.Kesel anyklaýyş amallarynda ulanmak üçin däl.
1. Nusgalary otag temperaturasyna öňünden deňleşdiriň.
2. Wiruslar ýokançdyr.Synagdan öň ähli zerur howpsuzlyk çäreleriniň görülmegini haýyş edýäris.
3. Nusganyň gaýta doňmagyndan we eremeginden gaça duruň, sebäbi bu wirus DNK / RNK-nyň zaýalanmagyna ýa-da hasyllylygynyň peselmegine sebäp bolup biler.
4. Özbaşdak taýýarlanan enjamlara RNase-den erkin turbageçiriji maslahatlar, 1,5 ml RNase-den merkezden gaçyryş turbalary, sentrifuga, worteks mikser we turbalar girýär.
5. Kitap ulanylanda, laboratoriýa palto, bir gezek ulanylýan lateks ellikleri we bir gezek ulanylýan maska geýiň we RNase hapalanmak howpuny azaltmak üçin RNase-den peýdalanylýan materiallary ulanyň.
6. Başga görkezilmedik bolsa, otag temperaturasynda ähli ädimleri ýerine ýetiriň.
Mehanizm we iş tertibi
