Wirus DNK / RNA çykarmak toplumy
Kitap (HC1009B) gan, serum, plazma we ýuwujy suwuklyk ýaly dürli suwuk nusgalardan ýokary arassa wirusly nuklein kislotalaryny (DNK / RNA) çalt çykaryp biler, bu bolsa paralel nusgalaryň ýokary geçişine mümkinçilik berýär.Kitapda özboluşly oturdylan superparamagnetik kremniý esasly magnit monjuklary ulanylýar.Üýtgeşik bufer ulgamynda beloklaryň we beýleki hapalaryň ýerine nuklein kislotalary wodorod baglanyşyklary we elektrostatik baglanyşyk bilen adsorbsiýa edilýär.Nuklein kislotalaryny öz içine alýan magnit monjuklar galan beloklary we duzlary aýyrmak üçin ýuwulýar.Az duzly bufer ulanylanda, nuklein kislotalary çalt bölmek we arassalamak maksadyna ýetmek üçin magnit monjuklaryndan nuklein kislotalary çykýar.Operasiýa prosesi ýönekeý, çalt, ygtybarly we täsirli we alnan nuklein kislotalary ters transkripsiýa, PCR, qPCR, RT-PCR, RT-qPCR, indiki nesil yzygiderliligi, biochip derňewi ýaly aşaky synaglar üçin gönüden-göni ulanylyp bilner. we ş.m.
Saklamak şertleri
15 ~ 25 at derejesinde saklaň we otag temperaturasynda daşaň.
Goýmalar
Gan, serum, plazma, siňdiriji, dokumalar birmeňzeş we ş.m.
Synag prosesi
1. Mysal gaýtadan işlemek
1.1 Gan, serum we plazma ýaly suwuk nusgalarda wiruslar üçin: çykarmak üçin ulanylýan 300μL adatdan daşary tebigat.
2.2 Swab nusgalary üçin: swab nusgalaryny konserwasiýa erginini, worteks 1 minutlyk turbalara ýerleşdiriň we çykarmak üçin 300μL adatdan daşary tebigaty alyň.
1.3 Dokuma gomogenatlary, dokumalar erginleri we daşky gurşaw nusgalaryndaky wiruslar üçin: 5-10 minutlap nusgalary duruň we çykarmak üçin 300μL adatdan daşary tebigaty alyň.
2. Taýýarlyk taýýarreagent
Kitapdan öňünden gaplanan reagentleri çykaryň, magnit monjuklaryny täzeden dikeltmek üçin birnäçe wagt belläň we garyşdyryň.Reagentleri we magnit monjuklary guýynyň düýbüne çümdürmek üçin tabagy ýuwaşlyk bilen silkäň.Tabagyň ugruny tassyklaň we möhürlenen alýumin folga bilen seresaplyk bilen ýyrtyň.
Suwuklygyň dökülmezligi üçin möhürleýji plyonkany ýyrtanyňyzda titremeden gaça duruň.
3. Işlemek awtomatgural
3.1 96 çuň guýynyň 1-nji ýa-da 7-nji sütünindäki guýulara 300μL nusga goşuň (täsirli işleýän guýynyň ýagdaýyna üns beriň).Nusganyň giriş mukdary 100-400 μL bilen gabat gelýär.
3.2 96 guýy çuň guýy plastinkasyny nuklein kislotalarynyň ekstraktoryna salyň.Magnit çybyk ýeňlerini geýiň we magnit çybyklaryny doly gurşap alyň.
3.3 Awtomatiki usulda çykarmak üçin programmany aşakdaky ýaly düzüň:
3.4 Çykarylandan soň, eluenti 96 çuň guýy plastinkasynyň 6-njy ýa-da 12-nji sütünlerinden (täsirli işleýän guýynyň ýagdaýyna üns beriň) arassa Nukleýziz merkezden gaçyryş turbasyna geçiriň.Derrew ulanmasaňyz, önümleri -20 at-da saklaň.
Bellikler
Gözleg üçin diňe ulanyň.Kesel anyklaýyş amallarynda ulanmak üçin däl.
1. Çykarylan önüm DNK / RNK.Amal wagtynda RNase tarapyndan RNK-nyň zaýalanmagynyň öňüni almak üçin aýratyn üns berilmelidir.Ulanylan gap-gaçlar we nusgalar bagyşlanmalydyr.Thehli turbalar we turbalar üçin maslahatlar sterilizasiýa edilmeli we DNase / RNase-den erkin bolmaly.Operatorlar poroşoksyz ellik we maska geýmeli.
2. Ulanylmazdan ozal görkezme gollanmasyny üns bilen okaň we görkezme gollanmasyna laýyklykda işlediň.Nusga gaýtadan işlemek ultra arassa skameýkada ýa-da biologiki howpsuzlyk kabinetinde geçirilmelidir.
3. Awtomatiki nuklein kislotasyny çykarmak ulgamy UV tarapyndan ulanmazdan ozal we soň 30 minut dezinfeksiýa edilmelidir.
4. Çykarylandan soň eluentde magnitli monjuklaryň yzlary bolup biler, şonuň üçin magnit monjuklara ymtylmaň.Magnit monjuklar islenýän bolsa, magnit stend bilen aýrylyp bilner.
5. Dürli reagentler üçin ýörite görkezmeler ýok bolsa, olary garyşdyrmaň we toplumlaryň ulanyş möhletinde ulanylýandygyna göz ýetiriň.
6. Samhli nusgalary we reagenti dogry taşlaň, ähli iş ýüzlerini 75% etanol bilen gowy süpüriň we dezinfeksiýa ediň.
